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Zwei Jahre nachdem Commander Shepard die eindringenden Reaper, die auf die Zerstörung organischen Lebens aus waren, zurückgeschlagen hat, ist ein mysteriöser neuer Feind aufgetaucht. Am Rande des bekannten Weltraums wird etwas stillschweigend ganze menschliche Kolonien entführt. Nun muss Shepard mit Cerberus zusammenarbeiten, einer skrupellosen Organisation, die sich um das Überleben der Menschheit um jeden Preis bemüht, um die schrecklichste Bedrohung zu stoppen, der die Menschheit je gegenüberstand.

Um diese gefährliche Mission überhaupt in Angriff nehmen zu können, muss Shepard das elitärste Team der Galaxie zusammenstellen und das mächtigste Raumschiff, das je gebaut wurde, kommandieren. Selbst dann sagen sie, es wäre Selbstmord. Commander Shepard hat vor, ihnen das Gegenteil zu beweisen.